發(fā)布時(shí)間: 2023-07-11 點(diǎn)擊次數(shù): 1938次
超微量分光光度計(jì)是一種常見的實(shí)驗(yàn)儀器,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。光度計(jì)基于光的吸收原理,通過測(cè)量溶液對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收程度來定量分析樣品中的化合物含量。其工作原理如下:
1、光源:光度計(jì)通常采用可見光或紫外光作為光源。光源發(fā)出一束特定波長(zhǎng)的光,并通過樣品池照射樣品。
2、樣品測(cè)量:樣品中的化合物會(huì)吸收一定波長(zhǎng)的光,而其他波長(zhǎng)的光則透過樣品。分光光度計(jì)會(huì)測(cè)量透射光強(qiáng)度的變化,以獲得樣品的吸光度。
3、參比測(cè)量:為了排除光源強(qiáng)度、光路系統(tǒng)和溶劑的影響,光度計(jì)還需要同時(shí)進(jìn)行參比測(cè)量,即將純?nèi)軇┳鳛閷?duì)照,用其吸光度與樣品相比較,得出樣品中化合物的吸光度。
4、數(shù)據(jù)分析:通過對(duì)比樣品和對(duì)照的吸光度值,可以計(jì)算出樣品中特定化合物的濃度。
以下是超微量分光光度計(jì)的常規(guī)使用方法:
1、準(zhǔn)備工作:將光度計(jì)接入電源,并確保儀器正常啟動(dòng)。檢查樣品池的清潔程度,如有污染應(yīng)先進(jìn)行清洗。
2、設(shè)置波長(zhǎng)和光程:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)量波長(zhǎng)和光程,以確保獲得準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果。
3、樣品操作:將待測(cè)樣品轉(zhuǎn)移至樣品池中。注意避免氣泡產(chǎn)生,同時(shí)確保樣品填滿整個(gè)池。
4、參比操作:在一個(gè)相同的樣品池中放置純?nèi)軇┳鳛閰⒈?。這樣可以消除光源強(qiáng)度和儀器偏差對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。
5、進(jìn)行測(cè)量:選擇測(cè)量模式,啟動(dòng)測(cè)量過程。儀器將自動(dòng)記錄并顯示樣品和參比的吸光度值。
6、數(shù)據(jù)處理:根據(jù)測(cè)量結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)曲線等,計(jì)算出樣品中化合物的濃度。
超微量分光光度計(jì)在多個(gè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用:
1、生物化學(xué):光度計(jì)可用于蛋白質(zhì)和核酸的定量分析,例如測(cè)定DNA、RNA的含量、蛋白質(zhì)濃度的測(cè)量等。
2、藥物研發(fā):在藥物研發(fā)過程中,光度計(jì)可用于藥物穩(wěn)定性和反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的研究,以及活性成分濃度的測(cè)量。
3、環(huán)境監(jiān)測(cè):光度計(jì)在環(huán)境監(jiān)測(cè)中可用于水質(zhì)、大氣污染物等的定量分析,有助于評(píng)估環(huán)境中有害物質(zhì)的濃度和變化。
4、食品檢測(cè):該儀器可以用于食品中添加劑、污染物等的濃度測(cè)量,為食品安全性評(píng)估提供數(shù)據(jù)支持。